摘要:目的]研究低压低氧对巨噬细胞坏死性凋亡和动脉粥样斑块不稳定性的影响,并探讨其可能的机制。 [方法]分离、培养小鼠骨髓源性巨噬细胞,分为对照组(21%氧浓度)和低氧组(3%氧浓度),48 h后检测细胞坏死性凋亡,Western blot测定坏死性凋亡相关蛋白的表达。选用健康雄性ApoE－/－小鼠,予以高脂饮食喂养,并随机分为对照组和低压低氧组,16周后检测小鼠血脂和炎症因子水平,HE染色观察粥样斑块面积和坏死核心大小,Masson染色检测斑块内胶原含量,免疫组织化学染色和Western blot检测斑块中巨噬细胞数量和坏死性凋亡相关蛋白的表达。 [结果]低氧引起巨噬细胞坏死性凋亡增加(P＜0.01),坏死性凋亡抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)可减少低氧导致的细胞死亡(P＜0.05)；低氧导致巨噬细胞中RNA特异性腺苷脱氨酶1(ADAR1)的表达减少(P＜0.01),Z型核酸结合蛋白1(ZBP1)、磷酸化受体结合丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-RIPK3)和磷酸化混合谱系激酶结构域样蛋白(p-MLKL)的表达增多(均P＜0.01)。与对照组相比,低压低氧组ApoE－/－小鼠的血脂水平无显著改变(P＞0.05),血清炎症因子水平(TNF-α、IL-1β、IL-6和MCP-1)升高(均P＜0.05),动脉粥样硬化斑块面积增加(P＜0.05),斑块内坏死核心面积增加、胶原含量减少、巨噬细胞数量增加、ADAR1表达减少、ZBP1和p-MLKL表达增多(均P＜0.01)。 [结论]低压低氧引起巨噬细胞中ADAR1/ZBP1表达失衡,激活RIPK3/MLKL信号通路,促进巨噬细胞坏死性凋亡,增加斑块坏死核心面积,导致动脉粥样硬化斑块不稳定性增加。

摘要:目的 观察不同时间低压低氧刺激下SD大鼠肺动脉压及肺组织骨桥蛋白(OPN)表达的变化,探讨OPN在肺动脉高压发病机制中的作用。方法 将30只SD大鼠随机分成5组:对照组(海拔2 260 m)、低压低氧(低压氧舱模拟5 000 m海拔)1天组、7天组、14天组、21天组,每组动物均测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室肥厚指数[RV/(LV+S)]；并分别采用RT-PCR法检测各组大鼠肺组织中OPN mRNA 的水平,Western blot 技术检测各组大鼠肺组织中OPN蛋白表达水平。结果 低压低氧1天、7天、14天、21天组动物mPAP均高于对照组(P<0.05),1天、7天、14天组呈逐渐增高趋势、21天组mPAP下降,差异有显著性(P<0.05)；低压低氧7天组、14天组、21天组动物呈现随低氧时间延长RV/(LV+S)逐渐增高的趋势、均高于对照组和1天组(P<0.05),但1天组、7天组和对照组间差异无显著性(P>0.05)；RT-PCR法和Western blot法结果显示低压低氧1天、7天、14天、21天组动物肺组织中OPNmRNA、OPN蛋白表达水平与对照组比较均增高(P<0.05)。结论 低压低氧刺激可使mPAP和RV/(LV+S)增高并促进大鼠肺组织OPN的表达增高,因此OPN可能参与高原性心脏病形成中肺动脉压的增高和右心室重塑。

摘要:目的　证实慢性间歇性低压低氧（CIHH）通过抑制内质网应激（ERS）改善大鼠血管钙化。方法　使用维生素D3肌注和尼古丁灌胃（VDN）制备的大鼠在体血管钙化模型，检测主动脉组织Ca2+含量和碱性磷酸酶（ALP）活性以及血浆ALP活性，Western　blot检测相关蛋白的表达水平。结果　与对照组大鼠相比，VDN大鼠主动脉组织Ca2+含量和ALP活性以及血浆ALP活性均显著升高（P<0.05），同时主动脉组织平滑肌细胞收缩表型标志蛋白calponin和SM22α的表达水平显著下调（P<0.05），成骨样细胞表型标志蛋白骨形态发生蛋白2（BMP2）和　RUNX2的表达水平显著上调（P<0.05）。而CIHH能够显著改善VDN大鼠的上述改变。此外，VDN大鼠主动脉组织ERS标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CHOP（C/EBP　homologous　protein）和active-caspase12的表达水平较对照组大鼠显著升高（P<0.05），而CIHH能够显著抑制上述蛋白表达水平的升高（P<0.05）。结论　CIHH可能通过抑制ERS，发挥改善血管钙化和平滑肌细胞表型转化的作用。

摘要:目的　探讨高海拔间歇性低压低氧（IHH）环境对载脂蛋白E基因敲除（ApoE－/－）小鼠血管重构的影响。方法　将14只8周龄雌性ApoE－/－小鼠随机分为对照组和IHH组，IHH组每天在低压舱模拟的4000　m海拔低压低氧环境中放置8　h，持续60天。干预完成后采用Masson染色测定胸主动脉管壁胶原含量，采用免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶（MMP）及其组织型基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）的表达情况。结果　与对照组比较，间歇性低压低氧组小鼠主动脉管壁胶原含量显著降低，MMP-9的表达显著增高，而TIMP-2的表达显著降低（P＜0.01），而MMP-2、MMP-14在两组间没有显著差异（P＞0.05）。结论　IHH可能通过加重ApoE－/－小鼠血管壁MMP-9和TIMP-2的表达失衡减少血管壁胶原含量，从而促进血管重构。

摘要:目的　观察红景天甙对间歇性低压低氧诱导的载脂蛋白E基因敲除（ApoE－/－）小鼠动脉粥样硬化的影响及其可能机制。方法　30只8周龄健康雄性ApoE－/－小鼠随机分为常压常氧组、间歇性低压低氧组、低压低氧＋红景天甙组，其中间歇性低压低氧组和低压低氧＋红景天甙组被放置在模拟海拔5000　m低压低氧舱内每天8　h，每组给予相同的普通饮食喂养，低压低氧＋红景天甙组灌服红景天甙30　mg/（kg·d），而常压常氧组和间歇性低压低氧组灌服等量蒸馏水，连续灌胃12周后取小鼠血样测空腹血糖和血脂，取小鼠主动脉根部，HE染色观察动脉粥样硬化斑块的大小，Masson染色观察斑块内胶原含量，Western　blot检测基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和组织型基质金属蛋白酶抑制剂2（TIMP-2）蛋白的表达。结果　三组空腹血糖和血脂水平无统计学差异（P>0.05）；与常压常氧组比较，间歇性低压低氧组动脉粥样硬化斑块面积明显增加（P<0.01），胶原含量明显减少（P<0.01）；与间歇性低压低氧组比较，低压低氧＋红景天甙组斑块面积、MMP-2和MMP-9蛋白水平明显降低（P<0.01），而斑块内胶原含量、TIMP-2蛋白水平明显增加（P<0.01）。结论　红景天甙能抑制间歇性低压低氧诱导的动脉粥样硬化斑块形成，并提高斑块的稳定性，其机制可能与红景天甙增加斑块内胶原含量有关。