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邵波,刘伯言,陈刘欣,温元元,王效琰,翟晓天,周正,李英,赵亚南,司艳红,秦树存.蛹虫草多糖降胆固醇作用的机制探讨[J].中国动脉硬化杂志,2020,(10):861~866
蛹虫草多糖降胆固醇作用的机制探讨
Study on the mechanism of Cordyceps militaris polysaccharides on cholesterol lowering
投稿时间:2019-12-16  修订日期:2020-02-18
DOI:
中文关键词:  蛹虫草  多糖  胆固醇  胆酸盐  HepG2细胞
英文关键词:Cordyceps militaris  polysaccharides  cholesterol  cholic acid salt  HepG2 cells
基金项目:国家自然科学基金(81600681);山东省泰山学者岗位专项科研基金(ts201511057);国家级大学生创新创业训练计划项目(201810439061)
作者单位E-mail
邵波 山东第一医科大学 山东省医学科学院基础医学院,山东省泰安市 271000 e-mail为15552849287@163.com,e-mail为13583815481@163.com,e-mail为zhaosixinkang@163.com 
刘伯言 山东第一医科大学 山东省医学科学院动脉粥样硬化研究所,山东省泰安市 271000  
陈刘欣 山东第一医科大学 山东省医学科学院基础医学院,山东省泰安市 271000  
温元元 山东第一医科大学 山东省医学科学院动脉粥样硬化研究所,山东省泰安市 271000  
王效琰 山东第一医科大学 山东省医学科学院基础医学院,山东省泰安市 271000  
翟晓天 山东第一医科大学 山东省医学科学院基础医学院,山东省泰安市 271000  
周正 山东第一医科大学 山东省医学科学院基础医学院,山东省泰安市 271000  
李英 山东第一医科大学 山东省医学科学院动脉粥样硬化研究所,山东省泰安市 271000  
赵亚南 山东第一医科大学 山东省医学科学院动脉粥样硬化研究所,山东省泰安市 271000  
司艳红 山东第一医科大学 山东省医学科学院基础医学院,山东省泰安市 271000 e-mail为15552849287@163.com,e-mail为13583815481@163.com,e-mail为zhaosixinkang@163.com 
秦树存 山东第一医科大学 山东省医学科学院动脉粥样硬化研究所,山东省泰安市 271000 e-mail为15552849287@163.com,e-mail为13583815481@163.com,e-mail为zhaosixinkang@163.com 
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中文摘要:
      目的 提取并纯化蛹虫草多糖(CMPS),分析相对分子质量分布,初步探讨其降胆固醇的作用机制。方法 通过热水提取-醇沉法分离CMPS,采用Sevage试剂、AB-8大孔吸附树脂进行纯化,应用高性能凝胶渗透色谱明确CMPS相对分子质量分布。模拟机体胃肠道环境,测定不同质量浓度CMPS结合胆酸盐能力;培养HepG2细胞,观察CMPS对肝细胞增殖率及细胞内胆固醇水平的影响,蛋白免疫印迹分析肝细胞内3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA-R)及甾醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)表达变化。结果 CMPS中相对分子质量为3 119 kDa的多糖含量最高;CMPS体外结合胆酸盐能力较强,与胆酸钠、牛磺胆酸钠及甘氨胆酸钠的结合率分别达到63%、62%和50%。细胞实验数据表明低于200 mg/L的CMPS干预HepG2细胞24 h没有抑制其增殖率。同时,在安全质量浓度范围内(<200 mg/L),CMPS可显著下调肝细胞内SREBP-2和HMG-CoA-R蛋白表达,降低肝细胞内总胆固醇水平。结论 CMPS具有良好的体外降胆固醇活性。
英文摘要:
      Aim To extract and purify Cordyceps militaris polysaccharides (CMPS), analyze its molecular weight distribution and preliminarily explore its mechanism of cholesterol lowering. Methods CMPS was separated by hot water extraction and alcohol precipitation, and purified by sevage reagent and AB-8 macroporous adsorption resin. The molecular weight distribution of CMPS was determined by high-performance gel permeation chromatography. Then, the ability of CMPS to bind cholic acid salt was measured in a simulated gastrointestinal environment. Meanwhile, HepG2 cells were cultured and the effect of CMPS on proliferation rate and total cholesterol (TC) level was observed in HepG2 cells. The protein expressions of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMG-CoA-R) and sterol regulatory element binding protein-2 (SREBP-2) in hepatocytes were analyzed by Western blot. Results The content of polysaccharides with molecular weight of 3 119 kDa in CMPS was the most, followed by 649 kDa and 20 kDa. The binding ability of CMPS to cholic acid salt was strong, and the binding rates of CMPS to sodium cholate, sodium taurocholate and sodium glycine cholate were respectively 63%, 62% and 50%. Cell culture showed CMPS concentration lower than 200 mg/L did not inhibit the growth of HepG2 cells after treatment for 24 hours. CMPS significantly down-regulated the protein expressions of HMG-CoA-R and SREBP-2 and decreased TC level in hepatocytes. Conclusion CMPS has the potential to lower cholesterol level.
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