β-神经生长因子基因转染对人脐静脉内皮细胞功能的影响
DOI:
作者:
作者单位:

作者简介:

通讯作者:

基金项目:

国家自然科学基金资助(81270280)


Influence of β-NGF Gene Transfection on Cell Functions of Human Umbilical Vein Cells
Author:
Affiliation:

Fund Project:

  • 摘要
  • |
  • 图/表
  • |
  • 访问统计
  • |
  • 参考文献
  • |
  • 相似文献
  • |
  • 引证文献
  • |
  • 资源附件
    摘要:

    目的 研究β-神经生长因子(β-NGF)基因转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对细胞增殖、单克隆形成、细胞周期、细胞凋亡、细胞迁移相关功能的影响。方法 将人源β-NGF基因重组的真核表达质粒(pEGFP-N1/β-NGF)转染至HUVEC,同时设置pEGFP-N1空载组、正常组(未转染质粒)、酪氨酸激酶受体A(TrkA)抑制剂组(β-NGF基因转染组加入1∶1000的K252a)。观察转染前后细胞形态学变化,利用real-time PCR和Western blot检测β-NGF基因转染表达效果,MTT法检测β-NGF基因转染对细胞增殖的影响,平板单克隆实验检测β-NGF基因转染对细胞单克隆形成能力的变化,流式细胞术检测β-NGF基因转染对细胞周期和细胞凋亡率的影响,Transwell方法检测转染前后细胞迁移能力的变化,Western blot检测β-NGF基因转染前后TrkA和血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化。结果 β-NGF基因成功转染HUVEC 48 h后能够显著提高β-NGF mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05),同时促进细胞增殖、单克隆形成、细胞迁移能力,并影响细胞周期抑制细胞凋亡率(P<0.05)。β-NGF基因转染HUVEC后TrkA和VEGF表达水平也随之显著上升(P<0.05),但受到TrkA抑制剂的抑制。结论 β-NGF基因能够成功转染HUVEC并显著表达,进而促进细胞增殖、单克隆形成、细胞迁移能力,并影响细胞周期抑制细胞凋亡率,而其发挥作用与TrkA结合诱导VEGF表达上调有关。

    Abstract:

    Aim To investigate the effect of β-nerve growth factor (β-NGF) gene transfected human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) on cell function related to proliferation,monoclonal formation,cell cycle,apoptosis,migration. Methods The recombination human β-NGF gene expression eukaryotic plasmid with EGFP (pEGFP-N1) was transfected into HUVEC,HUVEC without transfected plasmid as the normal control group,HUVEC with empty vector (pEGFP-N1) as the negative control group,and-NGF gene transfection with the 1∶1000 K252a as the tyrosine receptor kinase A (TrkA) inhibition group.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

潘黎明,盛梦婷,黄子瑞,李俊明.β-神经生长因子基因转染对人脐静脉内皮细胞功能的影响[J].中国动脉硬化杂志,2015,23(03):224~230.

复制
分享
文章指标
  • 点击次数:
  • 下载次数:
历史
  • 收稿日期:2014-09-09
  • 最后修改日期:
  • 录用日期:
  • 在线发布日期: