外源性核仁素转基因小鼠的构建与鉴定
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    目的最近研究表明核仁素(nucleolin,Ncl)蛋白作为一种内源性保护蛋白,在心肌细胞受损过程中发挥了重要的内源性保护作用。以往对核仁素发挥心肌保护作用的机制研究常局限于细胞水平。本研究构建并鉴定了携带有外源核仁素基因的转基因小鼠,为从整体水平上研究核仁素对心肌功能的影响,发挥心肌保护作用的机制提供动物模型。方法采用基因重组法将小鼠核仁素(Ncl)基因的全长cDNA置于α-肌球蛋白重链(α-MHC)启动子下游构建成α-MHC-Ncl重组载体,通过双酶切及基因测序鉴定其正确性;通过原核显微注射将该载体导入小鼠受精卵原核中,经注射且状态良好的受精卵回输至假孕雌鼠输卵管中,剪取0.5 cm仔鼠的鼠尾,收集DNA,进行PCR鉴定。结果双酶切及基因测序显示成功构建了α-MHC-Ncl重组质粒,将其显微注射到小鼠受精卵中,得到G0代小鼠106只,PCR确定了5只整合有Ncl基因的首建鼠。结论核仁素基因可以整合到小鼠体内,得到的转基因小鼠可能成为有效的动物模型,用于研究核仁素在心肌保护方面发挥的生物学作用。

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周斌,蒋碧梅.外源性核仁素转基因小鼠的构建与鉴定[J].中国动脉硬化杂志,2010,18(9):676.

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  • 收稿日期:2010-07-12
  • 最后修改日期:2010-09-10
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